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注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
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產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
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50T甲型H1N1（2009）/甲型流感病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
50T |
BH-P63212 |
它具有下列特點(diǎn)：
1. 即開即用，用戶只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化，靈敏性高。
3. 提供陽性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高，引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計(jì)，不會(huì)跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（*好用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
5. 換槍頭，從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
6. 換槍頭，從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
左右不對(duì)稱發(fā)育因子2(LEFTY2)ELISA試劑盒 LEFTY2 ELISA Kit 乙醛脫氫酶家族3成員A1抗體英文名稱：ALDH3A1 0.1ml
組織因子途徑抑制物-2(TFPI-2)ELISA試劑盒 TFPI-2 ELISA Kit 磷酸化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質(zhì)/α-晶體蛋白b鏈抗體英文名稱：phospho-alpha B Crystallin (Ser59) 0.1ml
組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒 TFPI ELISA Kit γ2肌動(dòng)蛋白抗體英文名稱：ACTG2 0.2ml
組織因子(TF)ELISA試劑盒 TF ELISA Kit gp130結(jié)合蛋白GAM抗體英文名稱：AES 0.2ml
組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒 t-PA ELISA Kit 繆勒2型受體抗體英文名稱：AMHR2 0.1ml
組織相容性復(fù)合體Ⅰ類相關(guān)基因A(MICA)ELISA試劑盒 MICA ELISA Kit 激活素受體1A抗體英文名稱：ACTR1 0.2ml
組織相容性2-K1-K區(qū)(H2-K1)ELISA試劑盒 H2-K1 ELISA Kit 激活素受體2A抗體英文名稱：ACTR2 0.2ml
組織多肽特異性抗原(TPS)ELISA試劑盒 TPS ELISA Kit 激活素受體2B抗體英文名稱：Activin Receptor Type IIB 0.2ml
組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒 TPA ELISA Kit 2號(hào)染色體開放閱讀框88抗體英文名稱：C2orf88 0.2ml
組織蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA試劑盒 HD ELISA Kit G蛋白偶聯(lián)受體ARHGEF18抗體英文名稱：ARHGEF18 0.2ml
組織蛋白酶抗體(Cath Ab)ELISA試劑盒 Cath Ab ELISA Kit 激活素受體1B抗體英文名稱：Activin A Receptor Type IB 0.2ml
組織蛋白酶S(CTSS)ELISA試劑盒 CTSS ELISA Kit 雄受體相關(guān)蛋白24抗體英文名稱：ARA24 0.2ml
組織蛋白酶L1(CTSL1/CTSL)ELISA試劑盒 CTSL1/CTSL ELISA Kit 淀粉樣肽前體蛋白抗體（C端）英文名稱：Amyloid Precursor Protein 0.1ml
組織蛋白酶H(CTSH)ELISA試劑盒 CTSH ELISA Kit 載脂蛋白C3抗體英文名稱：APOC3 0.2ml
組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒 cath-K ELISA Kit 腺苷酸環(huán)化酶2抗體英文名稱：ADCY2 0.2ml
50T甲型H1N1（2009）/甲型流感病毒PCR檢測(cè)試劑盒阿魏酸 Ferulic acid 537-98-4 20mg
阿魏酸乙酯 Ethyl 4'-hydroxy-3'-methoxycinnamate 4046-02-0 20mg
阿魏酸松柏酯 Coniferyl ferulate 63644-62-2 20mg
異阿魏酸 3-Hydroxy-4-methoxycinnamic acid 537-73-5 20mg
桉油精 Cineole 470-82-6 20mg
安石榴苷 Punicalagin 65995-63-3 20mg
石榴皮鞣素 Punicalin 65995-64-4 10mg
澳洲茄堿 Solasonine 19121-58-5 20mg
澳洲茄邊堿 Solamargine 20318-30-3 20mg
澳洲茄胺 Solasodine 126-17-0 20mg
阿多尼弗林堿 Adonifoline 甲酸溶液 100mg
安格洛苷C Angoroside C 115909-22-3 20mg
阿馬堿 Raubasine 483-04-5 20mg