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提高 RT-PCR 反應(yīng)的靈敏度與特異性方法

日期:2025-01-31 12:06
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摘要: 提高 RT-PCR 反應(yīng)的靈敏度與特異性方法: ① 確定模板 RNA 完整性好,無 DNA 污染。 ② RNA 模板中不應(yīng)含有擴(kuò)增反應(yīng)抑制劑。 ③ 使用適量的模板 RNA ,模板量太多會降低特異性,太少會導(dǎo)致擴(kuò)增不出條帶或條帶太弱。 ④ 若模板中有二級結(jié)構(gòu),可通過提高逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)溫度來提高擴(kuò)增效果。

提高 RT-PCR 反應(yīng)的靈敏度與特異性方法:

① 確定模板 RNA 完整性好,無 DNA 污染。

② RNA 模板中不應(yīng)含有擴(kuò)增反應(yīng)抑制劑。

③ 使用適量的模板 RNA ,模板量太多會降低特異性,太少會導(dǎo)致擴(kuò)增不出條帶或條帶太弱。

④ 若模板中有二級結(jié)構(gòu),可通過提高逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)溫度來提高擴(kuò)增效果。